薄層色譜TLC實驗中紫外線燈怎麼操作？
在進行薄層色譜TLC實驗時，操作紫外線燈時要佩戴好LUV-40紫外線防護麵罩，因為你TLC試驗用的都是雙波長紫外線燈，短波對皮膚很眼睛傷害特大，長波對眼睛傷害很大，不做防護臉部皮膚會起泡和紅腫，眼睛會造成玻璃體混濁，視力下降。
先將LEAC-280L紫外線燈電源插上，選擇打開需要照射的波長開關，把跑膠板放在紫外線燈下麵照射即可。如果有LCM-26紫外線觀察箱，在紫外線觀察箱裏麵觀察效果會更好。
薄層色譜（TLC）是shi一yi種zhong非fei常chang有you用yong的de跟gen蹤zong反fan應ying的de手shou段duan，還hai可ke以yi用yong於yu柱zhu色se譜pu分fen離li中zhong合he適shi溶rong劑ji的de選xuan擇ze。薄bo層ceng色se譜pu常chang用yong的de固gu定ding相xiang有you氧yang化hua鋁lv或huo矽gui膠jiao。流liu動dong相xiang則ze是shi一yi種zhong極ji性xing待dai選xuan的de溶rong劑ji。將jiang溶rong液ye中zhong的de反fan應ying混hun合he物wu點dian在zai薄bo板ban上shang，然ran後hou利li用yong毛mao細xi作zuo用yong使shi溶rong劑ji（或混合溶劑）沿板向上移動進行展開。根據混合物中組分的極性，不同化合物將會在薄板上移動不同的距離。極性強的化合物會“粘”在(zai)極(ji)性(xing)的(de)矽(gui)膠(jiao)上(shang)，在(zai)薄(bo)板(ban)上(shang)移(yi)動(dong)的(de)距(ju)離(li)比(bi)較(jiao)短(duan)。而(er)非(fei)極(ji)性(xing)的(de)物(wu)質(zhi)將(jiang)會(hui)在(zai)流(liu)動(dong)的(de)溶(rong)劑(ji)相(xiang)中(zhong)保(bao)留(liu)較(jiao)長(chang)的(de)時(shi)間(jian)從(cong)而(er)在(zai)板(ban)上(shang)移(yi)動(dong)較(jiao)大(da)的(de)距(ju)離(li)。化(hua)合(he)物(wu)移(yi)動(dong)的(de)距(ju)離(li)大(da)小(xiao)用(yong)Rf值來表達。這是一個位於0～1之間的數值，它的定義為：化合物距離基線（先點樣時已經確定）的距離除以溶劑的前鋒距離基線的距離。
薄層色譜（TLC）實驗步驟：
1、切(qie)割(ge)薄(bo)板(ban)。通(tong)常(chang)，買(mai)來(lai)的(de)矽(gui)膠(jiao)板(ban)都(dou)是(shi)方(fang)形(xing)的(de)玻(bo)璃(li)板(ban)，必(bi)需(xu)用(yong)鑽(zuan)石(shi)頭(tou)玻(bo)璃(li)刀(dao)按(an)照(zhao)模(mo)板(ban)的(de)形(xing)狀(zhuang)進(jin)行(xing)切(qie)割(ge)。在(zai)切(qie)割(ge)玻(bo)璃(li)之(zhi)前(qian)，用(yong)尺(chi)子(zi)和(he)鉛(qian)筆(bi)在(zai)薄(bo)板(ban)的(de)矽(gui)膠(jiao)麵(mian)上(shang)輕(qing)輕(qing)地(di)標(biao)出(chu)基(ji)線(xian)的(de)位(wei)置(zhi)（注意不要損壞矽膠麵）。jiezhufenglideboliqiegedaoheyibayindaochi，nibiankefangbiandijinxingboliqiege。dangzhengkuaibolibeiqiegehou，nijiukeyijinyibujiangqifenchengruogandulidexiaokuaile。（開始的時候，也許你會感到有一些難度，但經過一些訓練以後，你便會熟練地掌握該項技術。）
2、選xuan取qu合he適shi的de溶rong劑ji體ti係xi。化hua合he物wu在zai薄bo板ban上shang移yi動dong距ju離li的de多duo少shao取qu決jue於yu所suo選xuan取qu的de溶rong劑ji不bu同tong。在zai戊wu烷wan和he己ji烷wan等deng非fei極ji性xing溶rong劑ji中zhong，大da多duo數shu極ji性xing物wu質zhi不bu會hui移yi動dong，但dan是shi非fei極ji性xing化hua合he物wu會hui在zai薄bo板ban上shang移yi動dong一yi定ding距ju離li。相xiang反fan，極ji性xing溶rong劑ji通tong常chang會hui將jiang非fei極ji性xing的de化hua合he物wu推tui到dao溶rong劑ji的de前qian段duan而er將jiang極ji性xing化hua合he物wu推tui離li基ji線xian。一yi個ge好hao的de溶rong劑ji體ti係xi應ying該gai使shi混hun合he物wu中zhong的de化hua合he物wu都dou離li開kai基ji線xian，但dan並bing不bu使shi化hua合he物wu都dou到dao達da溶rong劑ji前qian端duan，Rf值好在0.15~0.85之間。雖然這個條件不一定都能滿足，但這應該作為薄層色譜分析的目標（在柱色譜中，合適的溶劑應該滿足Rf在0.2~0.3之間）。那麼，應該選取哪些溶劑呢？一些標準溶劑和他們的相對極性列於如下：
強極性溶劑：
甲醇〉乙醇〉異丙醇
中等極性溶劑：
乙腈〉乙酸乙酯〉氯仿〉二氯甲烷〉乙醚〉甲苯
非極性溶劑：
環己烷，石油醚，己烷，戊烷
常用混合溶劑：
乙酸乙酯/己烷：常用濃度0~30%。但有時較難在旋轉蒸發儀上完全除去溶劑。
乙醚/戊烷體係：濃度為0~40%的比較常用。在旋轉蒸發器上非常容易除去。
乙醇/己烷或戊烷：對強極性化合物5~30%比較合適。
二氯甲烷/己烷或戊烷：5~30%，當其他混合溶劑失敗時可以考慮使用。
3、將1~2mL選定的溶劑體係倒入展開池中，在展開池中放置一大塊濾紙。
4、將化合物在標記過的基線處進行點樣。我們用的毛細管是買來的，此外，毛細管也可從加熱過的Pasteur吸管上拔下。在跟蹤反應進行時，一定要點上起始反應物、反應混合物以及兩者的混合物。
5、展開：讓溶劑向上展開約90%的薄板長度。
6、從展開池中取出薄板並且馬上用鉛筆標注出溶劑到達的前沿位置。根據這個計算Rf的數值。
7、讓薄板上的溶劑揮發掉。
8、用非破壞性技術觀察薄板。好的非破壞性方法就是用紫外燈進行觀察。將薄板放在紫外燈下，用鉛筆標出有紫外活性的點。盡管在5.301中不用這種方法，但我們將采用另一常用的無損方法——用碘染色法。
9、用破壞性方式觀測薄板。當化合物沒有紫外活性的時候，隻能采用這種方法。在各種TLC顯(xian)色(se)劑(ji)的(de)調(tiao)配(pei)方(fang)法(fa)中(zhong)，提(ti)供(gong)了(le)很(hen)多(duo)非(fei)常(chang)有(you)用(yong)的(de)染(ran)色(se)劑(ji)。使(shi)用(yong)染(ran)色(se)劑(ji)時(shi)，將(jiang)幹(gan)燥(zao)的(de)薄(bo)板(ban)用(yong)鑷(nie)子(zi)夾(jia)起(qi)並(bing)放(fang)入(ru)染(ran)色(se)劑(ji)中(zhong)，確(que)保(bao)從(cong)基(ji)線(xian)到(dao)溶(rong)劑(ji)前(qian)沿(yan)都(dou)被(bei)浸(jin)沒(mei)。用(yong)紙(zhi)巾(jin)擦(ca)幹(gan)薄(bo)板(ban)的(de)背(bei)麵(mian)。將(jiang)薄(bo)板(ban)放(fang)在(zai)加(jia)熱(re)板(ban)上(shang)觀(guan)察(cha)斑(ban)點(dian)的(de)變(bian)化(hua)。在(zai)斑(ban)點(dian)變(bian)得(de)可(ke)見(jian)而(er)且(qie)背(bei)景(jing)顏(yan)色(se)未(wei)能(neng)遮(zhe)蓋(gai)住(zhu)斑(ban)點(dian)之(zhi)前(qian)，將(jiang)薄(bo)板(ban)從(cong)加(jia)熱(re)板(ban)上(shang)取(qu)下(xia)。
10、根據初始薄層色譜結果修改溶劑體係的選擇。如果想讓Rf變得更大一些，可使溶劑體係極性更強些；如果想讓Rf變bian小xiao，就jiu應ying該gai使shi溶rong劑ji體ti係xi的de極ji性xing減jian小xiao些xie。如ru果guo在zai薄bo板ban上shang點dian樣yang變bian成cheng了le條tiao紋wen狀zhuang而er不bu是shi一yi個ge圓yuan圈quan狀zhuang，那na麼me你ni的de樣yang品pin濃nong度du可ke能neng太tai高gao了le。稀xi釋shi樣yang品pin後hou再zai進jin行xing一yi次ci薄bo板ban層ceng析xi，如ru果guo還hai是shi不bu能neng奏zou效xiao，就jiu應ying該gai考kao慮lv換huan一yi種zhong溶rong劑ji體ti係xi。
11、做好TLC標記，計算每個斑點的Rf值，並且在筆記本中畫出圖樣。
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