LUYOR-3415RG用於大豆根係轉化的檢測
近日，華中農業大學在《new phytologist》期刊發表了文獻《The miR156b-GmSPL9d module modulates nodulation by targeting multiple core nodulation genes in soybean》，作者使用了美國路陽生產的便攜式雙波長熒光蛋白激發光源用於檢測大豆毛根的轉化。LUYOR-3415RG便攜式熒光激發光源能夠檢測動植物體內的熒光蛋白的表達。無需熒光顯微鏡，通過熒光觀察眼鏡就能直接觀察熒光蛋白的表達。以下是文獻摘要，具體文獻全文鏈接在本文末尾。
大豆是蛋白質的zui佳來源之一，是人類和動物飲食的主食。由於大豆富含蛋白質，因此在發育和繁殖過程中，它對氮（N）的需求比其他作物高得多。大豆與土壤中固氮細菌建立了共生關係，這些細菌能夠轉化大氣中的二氮（N2）轉(zhuan)化(hua)為(wei)氨(an)，這(zhe)有(you)助(zhu)於(yu)滿(man)足(zu)其(qi)高(gao)氮(dan)需(xu)求(qiu)。作(zuo)為(wei)交(jiao)換(huan)，大(da)豆(dou)植(zhi)物(wu)為(wei)這(zhe)些(xie)細(xi)菌(jun)提(ti)供(gong)碳(tan)水(shui)化(hua)合(he)物(wu)和(he)其(qi)他(ta)營(ying)養(yang)物(wu)質(zhi)，以(yi)促(cu)進(jin)根(gen)瘤(liu)菌(jun)的(de)生(sheng)長(chang)和(he)增(zeng)殖(zhi)。共(gong)生(sheng)固(gu)氮(dan)不(bu)僅(jin)有(you)利(li)於(yu)提(ti)高(gao)大(da)豆(dou)的(de)產(chan)量(liang)，而(er)且(qie)是(shi)增(zeng)加(jia)耕(geng)地(di)氮(dan)供(gong)應(ying)以(yi)提(ti)高(gao)其(qi)他(ta)穀(gu)類(lei)作(zuo)物(wu)產(chan)量(liang)的(de)有(you)力(li)手(shou)段(duan)。因(yin)此(ci)，共(gong)生(sheng)固(gu)氮(dan)是(shi)與(yu)大(da)豆(dou)作(zuo)物(wu)產(chan)量(liang)和(he)質(zhi)量(liang)以(yi)及(ji)一(yi)般(ban)可(ke)持(chi)續(xu)農(nong)業(ye)相(xiang)關(guan)的(de)主(zhu)要(yao)因(yin)素(su)。
共生氮固定發生在大豆的指定根器官（例如根結節）中，該根瘤以根瘤菌為宿主。當土壤中的氮含量低時，大豆釋放異黃酮（例如染料木黃酮）以誘導根瘤菌產生點綴因子（NFs）。NF被大豆NF受體（NFR1和NFR5）ganzhibingchufatiaojiegenliuganranhejiejieqiguanfashengdexinhaojilianfanying，qiyouyixiliefayuguochengzucheng，baokuogenwaipizhixibaodequfenhua，jiejieyuanshixingcheng，jiejiechuxianhejiejiechengshu。yijingbiaoming，genliujunganranhejiejieqiguanfashengdefazuoshiyoujiejiexinhaotonglujiedaode，zaiguoqusanshinianzhongyijingquedinglexuduoguanjianchengfen。qizhong，jiejieqishi（NIN），一種RWP-RK轉錄因子和早期結節蛋白基因（例如ENOD40），是zui早確定的豆類結節所必需的調節因子，包括大豆。
LUYOR-3415RG用於大豆毛根轉化和重氮化芽孢杆菌接種
根據前麵描述的方法，使用根瘤菌K599進行大豆毛根轉化以生成複合植物）。對於根瘤菌接種，將轉基因複合植物移植到含有蛭石的花盆（10×10厘米）中，用Y. Wang等人描述的N-缺乏溶液灌溉。（2009）. 植物生長了1周的恢複期（16小時的光照，25°C和50%的相對濕度）。然後將植物接種在新製備的雙氮二元組菌株USDA110（OD）懸浮液中。600= 0.08）。接種後28 d，對每個毛根或每個根係的結核數進行評分，並在PBS（pH 7.5）中對根或結節進行短暫衝洗，立即在液氮中冷凍並儲存在-80°C下進行基因表達分析。對於miR156b/f-CRISPR/Cas9複合植株的表型分析，我們首先計算了複合植株每個毛根的結節數，然後提取DNA檢測出可選擇的標記條基因。通過Sanger測序驗證了推定的轉基因根係。對於GmSPL9d-CRISPR / Cas9根的表型分析，我們使用便攜式熒光手電筒鑒定了轉基因毛茸茸的根（LUYOR-3415RG，上海，中國）。檢查了每個轉基因根的結節數量，並通過Sanger測序證實了轉基因根係的突變。
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文獻地址：https://doi.org/10.1111/nph.17899
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