southern紫外交聯時間

southern紫外交聯時間

southern中紫外交聯時間怎麼確定？將尼龍膜置於濾紙上幹燥片刻，在紫外交聯儀中將轉有DNA的一麵向上用120mJ/cm2能(neng)量(liang)輻(fu)照(zhao)交(jiao)聯(lian)，紫(zi)外(wai)交(jiao)聯(lian)儀(yi)的(de)紫(zi)外(wai)傳(chuan)感(gan)器(qi)會(hui)根(gen)據(ju)當(dang)前(qian)紫(zi)外(wai)交(jiao)聯(lian)儀(yi)的(de)紫(zi)外(wai)線(xian)強(qiang)度(du)自(zi)動(dong)計(ji)算(suan)輻(fu)照(zhao)時(shi)間(jian)，當(dang)輻(fu)照(zhao)能(neng)量(liang)達(da)到(dao)設(she)定(ding)值(zhi)時(shi)候(hou)，會(hui)自(zi)動(dong)停(ting)止(zhi)輻(fu)照(zhao)。

紫外照射的目的在於使DNA 中的一小部分T 與膜表麵帶正電的氨基基團之間形成交聯(Church and Gilbert 1984)。紫外照射不能過度,否則將造成堿基T之間發生共價結合而降低雜交信號。交聯時將膜上帶有DNA的一麵朝向紫外光源。 

southern紫外交聯時間設置方法：

紫外交聯儀設置時間的步驟：按壓智能紫外交聯儀UCL-3200操作麵板上program按鍵，選擇時間模式，通過數字按鍵，輸入需要照射的時間，然後按壓enter按鍵，這樣需要的交聯時間就成功設置好了，按star按鍵，紫外交聯儀開始輻照

，屏幕顯示倒計時時間，交聯時間結束後
，交聯儀紫外燈自動停止運行。

southern紫外交聯能量

智能紫外交聯儀UCL-3200可用於Northern、Southern blotting、EMSA等膜交聯,當使用254 nm波長、能量為120.0mJ/cm2交聯時,尼龍模的氨基和DNA的胸腺嘧啶(或RNA的尿嘧啶)之間形成共價鍵穩定。

southern紫外交聯能量設置方法：

按壓智能紫外交聯儀操作麵板上program按鍵，選擇能量模式(energy)
，通過數字按鍵，輸入需要照射的能量（0.120J/cm2），然後按壓enter按鍵，這樣需要的交聯能量就成功設置好了，按star按鍵，紫外交聯儀開始輻照
，屏幕顯示剩餘能量，交聯時間結束後，交聯儀紫外燈自動停止運行。

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