藥物的光安全性評價

藥物的光安全性評價Photosafety Evaluation of Pharmaceuticals

1．前言

1.1．目的

benzhidaoyuanzedemudeshiweizhichiyaowulinchuangshiyanhuoshangshideguanganquanxingpinggutuijianbiaozhun，cujinjishuyaoqiudexietiaotongyi。qineirongbaokuozengjiaqidongguanganquanpingjiadeyinsuyijiyu ICH M3（R2）第14部分光安全性試驗結合考慮 （參考文獻 1）。本指導原則應減少各區域之間對光安全性評價技術要求出現實質性差異的可能性。

本指導原則分為幾個部分：第 2部分討論光安全性評價的考慮因素； 第3部分介紹目前的非臨床光安全性試驗方法
，但不涉及具體的評價策略； 第4部分介紹臨床光安全性評估；第 5部分介紹如何利用第 2

、3、4部分闡述的考慮因素和試驗方法，評估全身給藥或皮膚給藥途徑光安全性的策略。

根據 3R原則（減少/優化/替代）
，盡量減少動物的使用，應考慮采用非動物試驗的方法或以臨床試驗數據來評估光安全性。

1.2．背景

ICH M3 （R2） 為藥物研發相關的光安全性評估實施時間提供了指導性意見：建議進行潛在光毒性的初步評價
，必要時，應在大樣本受試者應用的臨床試驗（III期）開展前進行試驗評估。ICH S9也介紹了腫瘤藥物光安全性試驗的實施時間。但 ICH M3（R2）和 ICH S9均未提供有關試驗方案的具體信息。ICH S10 包括了進行光安全性試驗合理性和可能的評估方案內容的具體細節。

1.3．範圍

本指導原則通常適用於新的藥物活性成分（APIs）、含新輔料的臨床皮膚用製劑（包括皮膚貼劑）和光動力治療產品。

因為體外試驗方法預測眼部光毒性的可靠性未知，而且沒有標準的體內試驗方法評估經眼給藥途徑的藥物光毒性（見注釋 1），所以沒有對經眼給藥途徑的藥物提供具體指導意見。

光(guang)動(dong)力(li)治(zhi)療(liao)藥(yao)物(wu)是(shi)基(ji)於(yu)光(guang)化(hua)學(xue)反(fan)應(ying)產(chan)生(sheng)期(qi)望(wang)的(de)藥(yao)理(li)作(zuo)用(yong)而(er)開(kai)發(fa)
，通(tong)常(chang)不(bu)需(xu)要(yao)增(zeng)加(jia)光(guang)毒(du)性(xing)評(ping)價(jia)，但(dan)需(xu)進(jin)行(xing)毒(du)代(dai)動(dong)力(li)學(xue)及(ji)組(zu)織(zhi)分(fen)布(bu)評(ping)估(gu)，以(yi)期(qi)對(dui)患(huan)者(zhe)作(zuo)合(he)適(shi)的(de)風(feng)險(xian)管(guan)理(li)。

本指導原則一般不適用於多肽、蛋白
、抗體偶聯或寡聚核苷酸類藥物
，也不適用於已上市產品成分
，除非對 APIs 或輔料有新的安全性擔憂（如劑型由片劑改為外用膏劑）。

1.4．一般原則

藥物的光安全性評估是一個綜合的認知，同時包括對光化學特征、非臨床研究數據以及人體安全信息的評估，目的在於確定是否需要風險小化措施以預防人體不良事件的發生。

光安全性試驗評估應結合光毒性
、光過敏性、光遺傳毒性、光致癌性四種不同的反應進行。當前的觀點認為開展光遺傳毒性（注釋 2）和光致癌性試驗（ICH M3(R2)注釋 6）對人用藥物沒有意義
，因此本指導原則側重於光毒性和光過敏性，相關的定義如下：

光毒性（光刺激性）：由光誘導的
，組織對光反應化合物的急性反應。

光過敏性：藥物經光化學反應生成光產物（例如：蛋白加合物）導致的免疫反應。

光敏化偶爾作為描述光誘導組織反應的通用術語。但為了清晰地區分光過敏性和光毒性， 本指導原則不用“光敏化”。

如果一個化合物需要闡明其光毒性和/或光過敏性， 則應具有以下關鍵特征：

吸收光為自然光線（波長範圍為 290-700nm）

；

吸收紫外/可見光後產生活性物質；

在光暴露組織（如皮膚、眼睛等）有充分的分布；

如ru果guo一yi個ge化hua合he物wu不bu滿man足zu以yi上shang條tiao件jian中zhong的de一yi個ge或huo多duo個ge，通tong常chang不bu具ju有you直zhi接jie的de光guang毒du性xing擔dan憂you，但dan經jing由you間jian接jie機ji製zhi也ye可ke引yin起qi皮pi膚fu對dui光guang的de敏min感gan性xing增zeng加jia。本ben指zhi導dao原yuan則ze列lie舉ju的de試shi驗yan方fang法fa不bu能neng涵han蓋gai的de作zuo用yong機ji製zhi（同見 2.4節）。

2．光安全性評價的考慮因素

2.1．光化學性質

評估潛在光反應性的初步考慮因素是化合物在290~700nm 波長範圍內能否吸收光子。當化合物在290~700nm波長範圍內 （參考文獻3）的摩爾消光係數 （MEC）不高於 1000L/mol/cm時，認為該化合物不具有足夠的光反應性來產生直接的光毒性（詳見注釋3）。

光激活的分子可通過能量傳遞機製產生活性氧（ROS)
，包括超氧陰離子和單線態氧。即使光反應會產生其他分子（如光加合物或細胞毒性光產物）
，通常也會生成 ROS。因此，紫外可見光照射後生成的 ROS 可作為潛在光毒性的標誌物。

光穩定性試驗（參考文獻 4）也ye可ke提ti示shi潛qian在zai光guang反fan應ying性xing，但dan不bu能neng檢jian測ce出chu的de光guang反fan應ying化hua合he物wu

，而er且qie僅jin光guang降jiang解jie信xin息xi也ye不bu能neng說shuo明ming藥yao物wu具ju有you光guang毒du性xing，因yin此ci，僅jin根gen據ju光guang穩wen定ding性xing試shi驗yan不bu能neng確que定ding是shi否fou需xu要yao進jin一yi步bu的de光guang安an全quan性xing評ping價jia。光guang化hua學xue性xing質zhi的de評ping估gu應ying按an照zhao高gao質zhi量liang科ke學xue標biao準zhun進jin行xing，數shu據ju收shou集ji記ji錄lu隨sui時shi可ke用yong

，或huo符fu合he藥yao物wu非fei臨lin床chuang研yan究jiu質zhi量liang管guan理li規gui範fan/藥品生產質量管理規範（GLP/GMP）。

2.2．組織分布/藥代動力學

在zai一yi定ding的de光guang暴bao露lu時shi間jian內nei
，組zu織zhi內nei光guang反fan應ying化hua合he物wu濃nong度du是shi確que定ding能neng否fou發fa生sheng光guang毒du性xing反fan應ying的de關guan鍵jian藥yao代dai動dong力li學xue參can數shu。組zu織zhi內nei光guang反fan應ying化hua合he物wu濃nong度du取qu決jue於yu多duo種zhong因yin素su，如ru血xue漿jiang濃nong度du、 組織灌流情況、從血管到組織間隙、細胞隔室之間的分布
，組織內化合物的結合
、滯留和蓄積情況。暴露的持續時間取決於由血漿和組

織半衰期反應出的清除率。總體上，這些參數界定了光反應化合物在組織內的平均滯留時間。

化合物在組織內的結合
、滯zhi留liu或huo蓄xu積ji對dui光guang毒du性xing反fan應ying的de發fa生sheng不bu是shi關guan鍵jian因yin素su。如ru果guo一yi個ge分fen子zi發fa生sheng了le充chong分fen的de光guang反fan應ying，則ze其qi在zai達da到dao的de血xue漿jiang或huo組zu織zhi間jian隙xi濃nong度du時shi可ke能neng會hui導dao致zhi光guang毒du性xing反fan應ying。然ran而er，相xiang比bi於yu半ban衰shuai期qi和he滯zhi留liu時shi間jian較jiao短duan或huo組zu織zhi/血漿濃度比值較低的化合物
，血漿半衰期較長、光暴露組織平均滯留時間較長或組織/血xue漿jiang濃nong度du比bi值zhi較jiao高gao的de化hua合he物wu更geng易yi導dao致zhi光guang毒du性xing反fan應ying的de發fa生sheng。而er且qie化hua合he物wu濃nong度du維wei持chi在zai光guang化hua學xue反fan應ying濃nong度du臨lin界jie值zhi以yi上shang的de時shi間jian越yue長chang，在zai人ren體ti發fa生sheng光guang毒du性xing的de風feng險xian就jiu越yue大da。

suirandiyuzuzhinongduyuzhishi，guangduxingfanyingdefengxianruohuayouqikexuehelixing


，danmuqianbingmeiyoujiedinghuahewudetongyongyuzhi。jiyujutiwentijutifenxideyuanze，genjurentishijihuoyuqidezuzhiyaowunongduyijijieheyishangyinsu，panduanbuxuyaojinyibudeguanganquanxingpingjiakenengshihelide
，ruxitongbaolushuipinghendideyaowu，huoxuejiangbanshuaiqihuozuzhizhiliushijianhenduandeyaowu。

化合物與組織成分（如黑色素、角蛋白）的結合是導致組織滯留和/或(huo)蓄(xu)積(ji)的(de)一(yi)種(zhong)機(ji)製(zhi)。盡(jin)管(guan)黑(hei)色(se)素(su)結(jie)合(he)類(lei)藥(yao)物(wu)與(yu)黑(hei)色(se)素(su)結(jie)合(he)可(ke)增(zeng)加(jia)其(qi)組(zu)織(zhi)濃(nong)度(du)，但(dan)研(yan)究(jiu)經(jing)驗(yan)表(biao)明(ming)僅(jin)根(gen)據(ju)這(zhe)種(zhong)結(jie)合(he)機(ji)製(zhi)不(bu)會(hui)提(ti)示(shi)存(cun)在(zai)光(guang)安(an)全(quan)性(xing)擔(dan)憂(you)。

在動物單劑量給藥的組織分布試驗中，通常根據給藥後多個時間點藥物濃度情況即可充分評估組織/血漿濃度比
、組織滯留時間和潛在滯留/蓄積性。 應根據藥物的半衰期合理設置檢測時間點。

yijingzhengshi，ruguohuahewubeikejianguangjihuoqiezaitineizuzhixiaochubanshuaiqijiaochang，zezaiyongyaoguochengzhongrubaoluyuqiangguangxiahuifashengzuzhisunshang。yinci，duiyunaxiekejianguangjihuohoujuyoutineiguangduxinghuojiyuzuoyongjizhirenweijuyouguangduxingdehuahewu（如光動力治療藥物），需xu檢jian測ce體ti內nei組zu織zhi分fen布bu和he組zu織zhi特te定ding的de半ban衰shuai期qi。對dui於yu僅jin吸xi收shou紫zi外wai光guang或huo組zu織zhi消xiao除chu半ban衰shuai期qi短duan的de藥yao物wu，即ji使shi已yi知zhi具ju有you光guang反fan應ying性xing，不bu太tai可ke能neng存cun在zai體ti內nei組zu織zhi光guang毒du性xing風feng險xian。

2.3．代謝物

一般而言，因為通過代謝通常不會產生與母核明顯不同的生色基團，所以無需對代謝物進行單獨的光安全性評估。

2.4．藥理學特征

在很多情況下
，藥物引起的光毒性源於其化學結構，而非藥理作用。但某些藥理作用（如免疫抑製、血紅素穩態異常）能neng增zeng強qiang光guang誘you導dao反fan應ying的de敏min感gan性xing，如ru皮pi膚fu刺ci激ji性xing或huo紫zi外wai線xian誘you導dao皮pi膚fu腫zhong瘤liu的de形xing成cheng。這zhe些xie間jian接jie機ji製zhi沒mei有you體ti現xian在zai本ben指zhi導dao原yuan則ze列lie舉ju的de試shi驗yan策ce略lve，部bu分fen間jian接jie機ji製zhi可ke通tong過guo其qi他ta非fei臨lin床chuang藥yao理li毒du理li試shi驗yan進jin行xing闡chan明ming和he評ping價jia，其qi他ta間jian接jie機ji製zhi相xiang關guan的de光guang毒du性xing可ke能neng隻zhi有you通tong過guo人ren用yong經jing驗yan才cai能neng發fa現xian。

3．非臨床光安全性試驗

3.1．一般考慮

嚴yan謹jin地di選xuan擇ze試shi驗yan條tiao件jian，如ru同tong時shi考kao慮lv模mo型xing係xi統tong和he相xiang關guan的de輻fu射she光guang譜pu下xia的de暴bao露lu量liang等deng，在zai非fei臨lin床chuang光guang安an全quan性xing試shi驗yan中zhong很hen關guan鍵jian。理li想xiang的de情qing況kuang是shi，一yi個ge非fei臨lin床chuang試shi驗yan應ying同tong時shi具ju有you較jiao高gao的de靈ling敏min性xing和he特te異yi性xing（即低假陰性率和低假陽性率）。因為陰性試驗結果通常不需要進行進一步的光安全評價，所以非臨床光安全性試驗應具有高靈敏性，出現假陰性頻率低（即高陰性預測值），以支持本指導原則中的評價策略。現行的非臨床體外和體內試驗方法主要關注潛在光毒性的檢測，臨床光毒性的相關性並不確定。

在(zai)體(ti)外(wai)和(he)體(ti)內(nei)試(shi)驗(yan)中(zhong)，光(guang)照(zhao)條(tiao)件(jian)的(de)選(xuan)擇(ze)很(hen)重(zhong)要(yao)。自(zi)然(ran)光(guang)是(shi)人(ren)類(lei)可(ke)能(neng)經(jing)常(chang)接(jie)觸(chu)的(de)有(you)廣(guang)泛(fan)光(guang)譜(pu)範(fan)圍(wei)的(de)光(guang)源(yuan)。然(ran)而(er)對(dui)於(yu)日(ri)光(guang)沒(mei)有(you)明(ming)確(que)的(de)界(jie)定(ding)，其(qi)取(qu)決(jue)於(yu)許(xu)多(duo)因(yin)素(su)

，如(ru)緯(wei)度(du)、海拔、季節、日照時長和天氣情況。此外
，人體皮膚對自然光的敏感性取決於許多個體因素（如皮膚類型，解剖部位和膚色曬黑狀態等）。許多機構定義了標準化的日光暴露條件，為評估日光模擬光源的適用性，應考慮這些標準（如，參考文獻5），輻照度及照射劑量應根據應用光譜的 UVA部分進行標準化。當前的體外和體內光毒性試驗，已成功應用劑量範圍為 5-20J/cm2的 UVA
，與夏季正午時分
、在溫帶地區海邊長時間戶外活動時的光照相當。在人體中由 UVB 引起的曬傷反應通常會限製日光的總暴露量，但在非臨床光毒性試驗中，UVB的量不應受到限製
，但可降低（部分過濾）

，在不降低試驗靈敏度的情況下采用相關的 UVA劑量。UVB透入人體皮膚組織主要限於表皮
，而 UVA 可到達毛細血管，所以對於全身用藥來說
，UVA光化學活化的臨床相關性較 UVB更重要，而 UVB照射與應用於光暴露組織的局部用藥相關。

在研究方法中應清晰描述合適光源（光譜分布、輻照及其照度）的選擇和監測以及使用程序（如，參考文獻 6）。

3.2．采用化學分析的光化學反應

如果藥物研發者選擇評價光反應性
，應在合適條件下采用藥物製劑進行方法學驗證以確證其靈敏性
，其中一種方法是 ROS試驗（如..,參考文獻 7） ， 數據顯示此方法靈敏度高，可直接預測體內的光毒性物質
，但特異性低
、假陽性率高。

在合適條件下開展的該試驗的陰性結果提示光毒性的可能性很低，試驗濃度為 200µM即可檢測出，而陽性結果（任何濃度時）則預示著需進行進一步評估。

3.3．體外光毒性試驗

建(jian)立(li)了(le)許(xu)多(duo)評(ping)估(gu)化(hua)學(xue)物(wu)潛(qian)在(zai)光(guang)毒(du)性(xing)的(de)體(ti)外(wai)方(fang)法(fa)
，部(bu)分(fen)還(hai)沒(mei)有(you)進(jin)行(xing)驗(yan)證(zheng)，用(yong)於(yu)藥(yao)物(wu)檢(jian)測(ce)。部(bu)分(fen)試(shi)驗(yan)可(ke)用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)溶(rong)解(jie)在(zai)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)的(de)化(hua)合(he)物(wu)，根(gen)據(ju)溶(rong)解(jie)度(du)情(qing)況(kuang)
，可(ke)適(shi)用(yong)於(yu)藥(yao)物(wu)活(huo)性(xing)成(cheng)分(fen)或(huo)輔(fu)料(liao)。其(qi)他(ta)試(shi)驗(yan)可(ke)直(zhi)接(jie)用(yong)於(yu)組(zu)織(zhi)樣(yang)本(ben)表(biao)麵(mian)，適(shi)用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)擬(ni)局(ju)部(bu)應(ying)用(yong)的(de)製(zhi)劑(ji)。

應用廣泛的體外試驗是 3T3 中性紅攝取光毒性試驗（3T3 NRU-PT），參見經濟合作與發展組織（OECD）指導原則（參考文獻 6）

，目前認為是可溶性化合物合適的體外篩選方法。

雖然歐洲替代方法驗證中心（ECVAM） 的正式方法學驗證顯示該試驗靈敏度為 93％，特異性為 84％
，但藥企內部的經驗數據顯示該方法的特異性很低。用於藥物的原始 OECD方案並未經專門驗證，因此已有人提出對原始 OECD方案進行一些修改， 以解決藥物檢測方法的低特異性（見注釋 4） ，以上的變更適用於藥物檢測。3T3 NRU-PT 的靈敏度較高，因此

，如果一個化合物試驗結果為陰性，則人體光毒性的可能性會很低。但 3T3 NRU-PT試驗結果陽性不應作為可能具有臨床光毒性風險的標誌
，僅提示需要進一步的評估。

BALB/c 3T3 細胞係對 UVB敏感，初推薦的照射條件（參考文獻6）包括使用濾光片
， 減弱320nm以下的光波長。

但可根據光源和所用的濾光片調整UVB與 UVA的比例

，使該試驗能用以評估 UVB誘導的光毒性。 因為 UVB極少穿透表皮
，所以 UVB 誘導的光毒性對於全身暴露的藥物幾乎不是問題，但與局部用藥的相關性較好
，因此需對主要吸收UVB的局部用藥成分進行體外評價，可考慮采用變更照射條件（見上文）的 3T3 NRU-PT試驗，或選擇更好耐受 UVB的體外皮膚模型。

jianlidehanyoujiaozhicengderentipifumoxingkeyongyujiancegezhongleixingdejubuyingyongcailiao，baokuocongchunhuadehuaxuewudaozhongdelinchuangyongzhiji。muqianjianliderentipifumoxingkejianceyouhuowuguangzhaotiaojianxiadexibaohuoxing
，erqiejingzhengshikejianchuyizhiderentijixingpifuguangduxingwuzhi，danqilingmindudiyutineirentipifushiyan，ruyinqiyangxingfanyingdedinongdugaoyutineirentishiyan，yincilejiesuoxuanzederenyishiyanfangfademinganxinghenzhongyao，ruguoshidangerqiekexing，kegenjuqingkuangxiangyingtiaozhengshiyantiaojian（如測試更高濃度的製劑，延長暴露時間等）。

至今沒有不考慮給藥途徑，專用於評價眼部光毒性的體外模型。即使根據 3T3 NRU-PT或人體皮膚模型試驗的陰性結果提示光毒性風險較低，但對眼部光毒性的預測價值仍不可知。

3.4．體內光安全性試驗和全身用藥

已有許多動物種屬
，包括豚鼠、小鼠和大鼠
，用於檢測化合物的全身用藥光毒性，雖尚未有標準的試驗設計
，但好考慮以下因素。

動物種屬的選擇應考慮光照敏感性（如發生小紅斑的劑量）、耐nai熱re性xing及ji對dui照zhao物wu性xing能neng。盡jin管guan與yu有you色se皮pi膚fu相xiang比bi，無wu色se皮pi膚fu用yong於yu檢jian測ce光guang毒du性xing更geng敏min感gan，但dan有you色se和he無wu色se動dong物wu模mo型xing都dou可ke以yi用yong。然ran而er對dui於yu可ke與yu黑hei色se素su明ming顯xian結jie合he的de APIs（見 2.2節），如果無法確保靶組織有適當的暴露，則應考慮選擇有色皮膚動物模型。

如果開展體內光毒性研究，好在試驗方案設計前獲得化合物的藥代動力學信息
，以確保在與 Tmax相(xiang)近(jin)的(de)合(he)適(shi)時(shi)間(jian)點(dian)照(zhao)射(she)
，並(bing)有(you)助(zhu)於(yu)選(xuan)擇(ze)與(yu)預(yu)期(qi)臨(lin)床(chuang)暴(bao)露(lu)相(xiang)關(guan)的(de)合(he)適(shi)研(yan)究(jiu)周(zhou)期(qi)。如(ru)果(guo)沒(mei)有(you)化(hua)合(he)物(wu)的(de)藥(yao)代(dai)動(dong)力(li)學(xue)數(shu)據(ju)
，應(ying)將(jiang)收(shou)集(ji)藥(yao)代(dai)信(xin)息(xi)作(zuo)為(wei)體(ti)內(nei)光(guang)毒(du)性(xing)研(yan)究(jiu)的(de)內(nei)容(rong)。

雖sui然ran光guang毒du性xing是shi典dian型xing的de急ji性xing反fan應ying
，但dan應ying慎shen重zhong考kao慮lv設she計ji體ti內nei試shi驗yan的de研yan究jiu期qi限xian。化hua合he物wu重zhong複fu給gei予yu後hou在zai相xiang關guan光guang暴bao露lu組zu織zhi的de蓄xu積ji可ke能neng會hui增zeng強qiang光guang毒du性xing反fan應ying，同tong樣yang，化hua合he物wu每mei次ci給gei予yu後hou重zhong複fu光guang照zhao射she也ye會hui因yin累lei積ji損sun傷shang增zeng強qiang光guang毒du性xing反fan應ying。一yi般ban而er言yan
，采cai用yong臨lin床chuang給gei藥yao途tu徑jing，選xuan擇ze可ke行xing的de或huo幾ji天tian的de給gei藥yao期qi限xian較jiao為wei合he理li
，在zai給gei藥yao後hou Tmax附近的時間點進行每天的單次或重複照射。

全身給藥的非臨床體內光毒性試驗劑量選擇應支持人體試驗，並為人體風險評估提供有價值的信息。試驗的高劑量應符合 ICH M3（R2）第 1.5節中的推薦建議。如果高劑量組結果為陰性，則不需進行較低劑量的試驗。但如果預期試驗結果為陽性， 則應考慮比較Cmax增加劑量組以支持基於 NOAEL defengxianpinggu。shezhikongbaihefeizhaosheduizhaozuyouzhuyumingquehuahewuxiangguandeduxing，bingqiequfenzhaosheyufeizhaosheyoudaodebuliangfanying。ruguodongwukedadaodedaxitongbaoluliangdiyulinchuangbaoluliang，zeyongyinxingjieguoyucerentifengxiandekekaoxingzhidehuaiyi。

zaidiyuyinqihongbandezhengchangzhaoshejiliang，hongbanhoushuizhongshihuahewuyoudaoguangduxingmingandezaoqizhengzhuang。guangduxingdefanyingleixingyinhuahewueryi，yingpinggurenhequedingdeguangduxingfanyingdejiliangheshijianyilaixing，ruguokeneng，yingquedingwuduxingfanyingjiliang（NOAEL）。設置額外的檢測指標（如
，提示急性光刺激性的皮膚或淋巴結中早期炎症標記物），可進一步為風險鑒定提供支持性信息。

如果動物全身給予的藥物吸收大於400nm波長光，則應采用詳細的組織病理學檢查評估視網膜光毒性。對於僅吸收小於 400nm波長光的化合物，因為角膜、晶狀體和玻璃體的穿透性限製了該波長不能到達成人的視網膜
，則無需進行視網膜評估。

對(dui)於(yu)未(wei)經(jing)正(zheng)式(shi)驗(yan)證(zheng)的(de)體(ti)內(nei)光(guang)毒(du)性(xing)試(shi)驗(yan)，好(hao)應(ying)設(she)置(zhi)合(he)適(shi)的(de)化(hua)合(he)物(wu)包(bao)括(kuo)藥(yao)物(wu)作(zuo)為(wei)對(dui)照(zhao)進(jin)行(xing)充(chong)分(fen)觀(guan)察(cha)。為(wei)充(chong)分(fen)驗(yan)證(zheng)所(suo)選(xuan)擇(ze)的(de)方(fang)法(fa)，對(dui)照(zhao)品(pin)應(ying)包(bao)括(kuo)人(ren)體(ti)光(guang)毒(du)性(xing)化(hua)合(he)物(wu)

、代表不同化學類別和光毒性機製的化合物。在視網膜光毒性評估試驗，應選擇吸收可見光範圍（如波長大於400nm）的對照品。如果體內試驗已得到充分驗證


，或被廣泛接受並在試驗室建立，則不需要同時設置陽性對照化合物。

duiyuquanshengeiyaodehuahewu，renyonghoudeguangguominfanyingshaojian
，erqieshangweiyoupingguxitongyongyaohuahewudefeilinchuangguangguominxingshiyanmoxing

，suoyibujianyijinxingguangguominxingjiance。

3.5．體內光安全性試驗和皮膚用藥

用於研究全身用藥的主要推薦建議同樣適用於皮膚用藥，包括動物種屬選擇、yanjiuzhouqiyijiguangzhaotiaojian。duiyupifujubuyongyao
，yibanyingyonglinchuangzhijijinxingshiyan。yingjinkenengcaiyonglinchuangniyongtiaojian，zaigeiyaohoudetedingshijianduibaolubuweijinxingguangzhao，jiyushoushizhijideteshuxingzhiquedinggeiyaoheguangzhaozhijiandeshijianjiange。jiyuxiangguanzhongdianzhibiao（見 3.4 節）評估光毒性指征，並使用合適的對照品驗證試驗方法的靈敏性。皮膚給藥的光毒性研究一般無需評估藥物的係統暴露水平。

對於皮膚用藥，非臨床研究常結合急性光毒性（光刺激性）jinxingjiechuxingguangguominxingpinggu。danzhexieshiyanfangfabingweijingzhengguiyanzheng。yinci，suiranrenweizhexieyanjiuzhongguanchadaodejixingguangcijixingyurentixiangguan
，danbunengquedingqiduirenguangguominxingdeyucejiazhi。congjianguandejiaodu，yibanbutuijianzhezhongfeilinchuangguangguominxingshiyan。

4．臨床光安全性評估

可選擇多種途徑收集人體試驗數據，如標準的臨床研究不良事件報告

、專門的臨床光安全性試驗
，其具體策略基於具體問題具體分析的原則。

5．評估策略

藥物研發者可選擇不同的光安全性評估策略。ICH M3（R2）建議，在門診患者入組前應基於受試物的光化學性質和藥理/huaxueleibie，chubupingguqiqianzaiguangduxing。tuijianshouxianduiziwaikejianxishouguangpudetezhengjinxingpinggu
，yibimianjinyibudeguanganquanxingpinggu。ciwai，xupinggushoushiwuzaipifuheyandefenbuqingkuang，yijinyibuhuozhirentifengxianyijipanduanshifouxuyaojinxingjinyibudeshiyan。zhihou，biyaoshi
，yingzaishoushiwubaoluyudayangbenlianghuanzhedelinchuangshiyanqian（III期），進行潛在光毒性試驗評價（包括體外、體內或臨床試驗）。

圖 1列舉了可能的光毒性評價策略。該圖是基於本指導文件本節所述的策略製定。評估策略是靈活的，可根據具體情況進行取舍。

圖 1. 全身和皮膚給藥的可能的光毒性評估策略

* “否則”：數據不支持低的潛在光毒性

，或未得到數據（未開展試驗/評價）。

# yixianglianghaojinxingdetineiguangduxingshiyandeyinxingjieguodecankaojiazhidayutiwaishiyandeyangxingjieguo。yixiangkekaodelinchuangguangduxingpinggubiaomingwuanquanxingdanyoudecankaojiazhidayurenyifeilinchuangshiyanyangxingjieguo。genjujutiwentijutifenxideyuanze，zuzhifenbushujuyekefoudingtiwaiguangduxingshiyandeyangxingjieguo。zaimeiguo，duiyupifuyongyao，xuduinishangshizhijijinxingzhuanmendeguangduxinglinchuangshiyanyongyuzhichiqishangshishenqing。

$ 臨床評價包括標準的臨床研究不良事件報告、專門的臨床光安全性試驗。（與第 4 節保持一致）

§ 皮膚產品的光毒性評估無需考慮組織分布。

5.1．全身給藥藥物的技術要求

5.1.1．潛在光毒性評估

如果受試物的 MEC 不高於 1000L/mol/cm（波長在290~700nm)
，不建議進行光安全性試驗
，而且預測不會對人體有直接光毒性。但應關注經間接機製發生的光毒性（如偽卟啉症或卟啉症）
，盡管少見仍會發生。對於 MEC 不低於1000L/mol/cm 的化合物，如果藥物研發者選擇開展一種光反應性試驗，若得到陰性結果，可支持不需進一步光安全性評估的決策（見 3.2節）
，否則需開展非臨床和/或臨床光安全性評估。應對已有相關化學類別的化合物光毒性數據進行評價，以提示可采用的試驗方法。

5.1.2．光毒性試驗評估

根據 3R 原則，為減少動物的使用，通常在開展動物試驗前考慮一種經驗證的體外試驗方法（如，見指令2010/63/EU）。如果藥物研發者選擇一種體外方法，則 3T3 NRU-PT 是目前應用廣泛的試驗
，而且在很多情況下用於光毒性的初步檢測。3T3 NRU-PT 的de高gao靈ling敏min性xing使shi其qi陰yin性xing結jie果guo具ju有you較jiao好hao的de預yu測ce性xing，陰yin性xing結jie果guo通tong常chang可ke作zuo為wei無wu光guang毒du性xing的de充chong分fen證zheng據ju，這zhe種zhong情qing況kuang下xia，不bu建jian議yi進jin行xing進jin一yi步bu的de光guang安an全quan性xing試shi驗yan
，而er且qie可ke預yu測ce對dui人ren體ti不bu存cun在zai直zhi接jie的de光guang毒du性xing。

在某些情況下（如溶解性差的化合物）
，kenengbushiyicaiyongtiwaishiyanchubupingguguangduxing
，cishiyingkaolvjinxingdongwutineihuorentishiyanpinggu。huogenjujutiwentijutifenxideyuanze
，ruguoyouyaowudefenbushuju，zekezhichiwuxujinxingjinyibuguanganquanxingpinggudejuece（見 2.2節）。

如(ru)果(guo)體(ti)外(wai)光(guang)毒(du)性(xing)試(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)陽(yang)性(xing)，則(ze)需(xu)要(yao)開(kai)展(zhan)動(dong)物(wu)體(ti)內(nei)光(guang)毒(du)性(xing)試(shi)驗(yan)，以(yi)評(ping)估(gu)體(ti)外(wai)試(shi)驗(yan)確(que)定(ding)的(de)潛(qian)在(zai)光(guang)毒(du)性(xing)與(yu)體(ti)內(nei)試(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)的(de)相(xiang)關(guan)性(xing)。或(huo)基(ji)於(yu)具(ju)體(ti)問(wen)題(ti)具(ju)體(ti)分(fen)析(xi)的(de)原(yuan)則(ze)，如(ru)果(guo)藥(yao)物(wu)的(de)分(fen)布(bu)數(shu)據(ju)提(ti)示(shi)其(qi)體(ti)內(nei)光(guang)毒(du)性(xing)風(feng)險(xian)很(hen)低(di)，則(ze)無(wu)需(xu)進(jin)行(xing)進(jin)一(yi)步(bu)光(guang)安(an)全(quan)性(xing)評(ping)估(gu)（見 2.2 節）。另(ling)外(wai)一(yi)種(zhong)選(xuan)擇(ze)是(shi)，可(ke)在(zai)臨(lin)床(chuang)試(shi)驗(yan)過(guo)程(cheng)中(zhong)評(ping)估(gu)光(guang)安(an)全(quan)性(xing)風(feng)險(xian)，或(huo)臨(lin)床(chuang)試(shi)驗(yan)期(qi)間(jian)采(cai)取(qu)避(bi)光(guang)措(cuo)施(shi)。一(yi)項(xiang)合(he)適(shi)的(de)動(dong)物(wu)體(ti)內(nei)或(huo)人(ren)體(ti)光(guang)毒(du)性(xing)試(shi)驗(yan)陰(yin)性(xing)結(jie)果(guo)的(de)參(can)考(kao)價(jia)值(zhi)大(da)於(yu)陽(yang)性(xing)結(jie)果(guo)的(de)體(ti)外(wai)試(shi)驗(yan)，且(qie)該(gai)情(qing)況(kuang)下(xia)不(bu)建(jian)議(yi)進(jin)行(xing)進(jin)一(yi)步(bu)的(de)試(shi)驗(yan)，並(bing)可(ke)預(yu)測(ce)對(dui)人(ren)體(ti)不(bu)存(cun)在(zai)直(zhi)接(jie)的(de)光(guang)毒(du)性(xing)。

某些情況下，體內動物試驗結果陽性提示的風險程度
，可在基於 NOEAL 的風險評估中有所減弱，並通常考慮與Cmax的(de)比(bi)較(jiao)情(qing)況(kuang)，否(fou)則(ze)需(xu)進(jin)行(xing)臨(lin)床(chuang)評(ping)估(gu)。在(zai)所(suo)用(yong)情(qing)況(kuang)下(xia)，如(ru)果(guo)一(yi)項(xiang)可(ke)靠(kao)的(de)臨(lin)床(chuang)光(guang)毒(du)性(xing)評(ping)估(gu)充(chong)分(fen)提(ti)示(shi)無(wu)相(xiang)關(guan)擔(dan)憂(you)
，則(ze)其(qi)參(can)考(kao)價(jia)值(zhi)大(da)於(yu)非(fei)臨(lin)床(chuang)陽(yang)性(xing)結(jie)果(guo)的(de)提(ti)示(shi)價(jia)值(zhi)。

後續開展的光化學反應試驗（如 ROS 試驗）的陰性結果不能否定體外光毒性試驗的陽性結果。

如已開展動物或臨床光毒性試驗，則無需再開展光化學反應或體外光毒性試驗。

5.2．皮膚給藥藥物的技術要求

5.2.1．潛在光毒性評估

如果活性成分和輔料的 MEC 不高於 1000L/mol/cm（波長在 290~700nm)，不建議進行進一步的光安全性試驗，而且預測不會對人體有直接的光毒性。對於 MEC 不低於1000L/mol/cm 的化合物，光反應試驗（如 ROS 試驗）結果陰性可支持無需進行進一步光安全性評價的決策（注釋 5除外）。如需進一步評估，應對已有相關化學類別的化合物光毒性數據進行評估
，以提示可采用的試驗方法。

組zu織zhi分fen布bu不bu是shi皮pi膚fu給gei藥yao光guang毒du性xing的de考kao慮lv因yin素su，皮pi膚fu給gei藥yao直zhi接jie用yong於yu皮pi膚fu，因yin此ci除chu非fei用yong於yu通tong常chang不bu暴bao露lu於yu光guang的de部bu位wei，一yi般ban認ren為wei藥yao物wu存cun在zai於yu光guang暴bao露lu組zu織zhi。

5.2.2．光毒性及光過敏性試驗評估

隻要具有合適的檢測條件（如試驗濃度不受低溶解度的限製，可提供相關 UVB劑量），3T3 NRU-PT可單獨用於評估 APIs 及任何新輔料的潛在光毒性。如在體外未鑒定出任何光毒性成分，則認為該臨床製劑的潛在光毒性很低。

不能僅用 3T3 NRU-PT評價影響潛在光毒性反應的臨床製劑的某些性質（如皮膚滲透
，胞內攝取），因此仍有必要確認采用臨床製劑得到的整體陰性結果，和/或臨床試驗期間進行監測。

建立的人體皮膚模型可用於評估臨床製劑的潛在光毒性。在合適的試驗條件下（見 3.3 節），如果建立的人體皮膚模型試驗結果陰性，則認為製劑的直接潛在光毒性很低，此時通常不建議進行進一步的光毒性試驗（注釋 5 除外）。

如(ru)果(guo)無(wu)法(fa)進(jin)行(xing)合(he)適(shi)的(de)體(ti)外(wai)試(shi)驗(yan)
，則(ze)可(ke)開(kai)展(zhan)臨(lin)床(chuang)製(zhi)劑(ji)的(de)體(ti)內(nei)光(guang)毒(du)性(xing)試(shi)驗(yan)。如(ru)果(guo)開(kai)展(zhan)的(de)體(ti)內(nei)動(dong)物(wu)光(guang)毒(du)性(xing)研(yan)究(jiu)結(jie)果(guo)陰(yin)性(xing)，可(ke)充(chong)分(fen)說(shuo)明(ming)該(gai)製(zhi)劑(ji)無(wu)直(zhi)接(jie)光(guang)毒(du)性(xing)
，則(ze)不(bu)建(jian)議(yi)進(jin)一(yi)步(bu)的(de)光(guang)毒(du)性(xing)試(shi)驗(yan)（注釋 5除外）。 或者可臨床試驗中評估其潛在光毒性。

對於 MEC 高於 1000L/mol/cm(290~700nm)的 APIs 或(huo)新(xin)輔(fu)料(liao)的(de)皮(pi)膚(fu)用(yong)產(chan)品(pin)，除(chu)光(guang)毒(du)性(xing)試(shi)驗(yan)外(wai)通(tong)常(chang)需(xu)進(jin)行(xing)光(guang)過(guo)敏(min)性(xing)評(ping)估(gu)。由(you)於(yu)非(fei)臨(lin)床(chuang)光(guang)過(guo)敏(min)性(xing)試(shi)驗(yan)的(de)預(yu)測(ce)性(xing)未(wei)知(zhi)，通(tong)常(chang)使(shi)用(yong)擬(ni)上(shang)市(shi)製(zhi)劑(ji)進(jin)行(xing)臨(lin)床(chuang)評(ping)估(gu)，並(bing)在(zai) III期臨床試驗期間進行。

臨lin床chuang皮pi膚fu貼tie劑ji的de光guang安an全quan性xing評ping價jia可ke參can照zhao上shang述shu臨lin床chuang皮pi膚fu製zhi劑ji的de技ji術shu要yao求qiu，對dui於yu透tou皮pi貼tie劑ji
，皮pi膚fu及ji全quan身shen用yong藥yao的de技ji術shu要yao求qiu均jun可ke適shi用yong。此ci外wai，在zai整zheng體ti風feng險xian評ping估gu時shi應ying考kao慮lv臨lin床chuang用yong法fa（如推薦使用的皮膚部位、用藥期限）和貼劑基質的性質（如不透過 UV和可見光）。

6．注釋

注釋 1． 對於在 相關波長有吸收
、 MEC高於1000L/mol/cm 的經眼給藥（如滴眼、眼內注射）dehuahewu
，yinggenjuguangduxingpinggudeyibanyuanzejinxingqianzaiguangduxingpingjia。zhengtipinggushiyingkaolvyaowuzaiyanzhongdeshengwufenbujiyandeguangxuexingzhi，yijiyouguangaihuahewuhuoxiangguanhuaxueleibiehuahewuderenhekeyongxinxi。

因為隻有波長大於 400nm的光可到達成人的眼後部
，因此對於僅在波長低於 400nm有吸收、 並進行晶狀體後眼內注射（例玻璃體內）的化合物，其視網膜光毒性的擔憂較低，但 10 歲以下兒童的晶狀體不能完全防護波長低於 400nm 的光

注釋 2．不推薦光遺傳毒性作為標準光安全性試驗程序的一部分。過去，一些區域性指導原則（如 CPMP/SWP/398/01)推薦開展光遺傳性試驗，優先采用體外哺乳動物細胞光染色體畸變試驗（染色體畸變或微核試驗）。但自 CPMP/SWP指導原則頒布以來，以上模型的使用經驗顯示其過於敏感，有報道稱出現光染色體畸變假陽性（參考文獻 8）
，而且光遺傳毒性數據相關意義的闡釋與臨床增強 UV介導皮膚癌的相關性仍不清楚。

注釋 3．確定 MEC的標準化條件至關重要。根據分析要求（如溶解能力、 UV-可見光透光度）和生理相關性（如 pH7.4緩衝液）選擇合適的溶劑，推薦甲醇作為溶劑，並用於支持 1000L/mol/cm 的 MEC 閾值（參考文獻 3）。測量紫外-可見光譜時，應考慮潛在的局限性（如，由於高濃度或低溶解度，包括緩慢沉澱造成的偽影）。如果分子的生色基團對pH敏感（如酚結構，芳香胺，羧酸等），在 pH7.4 緩衝液條件下獲得的光譜可增加有關吸收光譜形狀和MECs差異的有效信息。如果在甲醇和 pH 調節條件下測定存在明顯差異
，則1000L/mol/cm的MEC閾值不能用於排除進一步的光安全性評估。

注釋 4．如 OECD TG432 所述
，製藥公司的一項調查顯示3T3 NRU-PT試驗中產生了高比例的陽性結果（約50％），其中大部分與動物或人體光毒性反應無關（參考文獻 9）。藥物回顧性數據顯示，大測試濃度從 1000μg/mL 降低至100μg/mL 是合理的（參考文獻 10）。達到該閾值未見任何明顯細胞毒性（照射下）的化合物
，認為無相關光毒性。此外，根據 OECD TG 432，歸為“可能具有光毒性”（即光刺激因子（PIF）值介於 2~5或平均光效應 （MPE） 值介於 0.10~0.15）一類的全身用藥的毒理學相關性是值得懷疑的
，該類化合物通常不需進行進一步的光安全性評價。對於 PIF 值介於 2~5且在沒有照射的情況下不能確定 IC50的化合物
，重要的是檢查采用 MPE 計算該化合物不被歸類為陽性，即
，MPE 小於0.15。

全身用藥藥物僅在體外濃度高於人體光暴露組織可到達濃度的許多倍時 3T3 NRU-PT結果陽性

，基於具體問題具體分析的原則，並與監管部門協商，可以認為人體光毒性的風險較低，不需進行進一步的體內試驗。

注釋 5．在美國，對於皮膚用藥，需對擬上市製劑（APIs與賦形劑）進行專門的光毒性（光刺激性）臨床試驗用於支持其上市申請。

7．術語

3T3 NRU-PT：體外 3T3中性紅攝取光毒性試驗。

評估：在本文件中，評估是對可用信息的評價，並不總意味開展額外的試驗。

生色基團：吸收可見光或紫外光的分子子結構。

皮膚用藥：用於皮膚局部的藥物。

直接光毒性：藥物或輔料吸收光誘導的光毒性。

間接光毒性：由藥物或輔料引起的細胞、生化或生理變化導致的光毒性，與藥物或輔料的光化學反應性無關（如血紅素穩態異常）。

輻照度：某一指定表麵上單位麵積所接受的紫外或可見光強度

，以 W/m2 or mW/cm2為單位。

照射：受試物或對象暴露於紫外線或可見光照射的過程。

MEC：摩爾消光係數（也稱摩爾吸光係數）反映分子對特定波長光的吸收能力（通常表示為L/mol/cm），並受溶劑等因素的影響。

MPE：平均光效應，是 3T3 NRU-PT試驗的結果，MPE基於比較完整的濃度-反應曲線得到（見 OECD TG 432）。

NOAEL：未見不良反應劑量。

OECD TG：經濟合作與發展組織，試驗指導原則。

門診病人研究：受試人群不局限於臨床研究地點的臨床研究。

光產物：光化學反應產生的新化合物或結構。

光反應性：化合物吸收光後與其他分子反應的性質。

PIF：光刺激因子
，是 3T3 NRU-PT試驗的結果，通過比較有無光照下的 IC50值得到。

ROS：活性氧，包括超氧陰離子和單線態氧。

全身用藥：給藥後會產生係統暴露的藥物。

UVA：紫外線 A（波長介於 320~400nm）。

UVB：紫外線 B（波長介於 280~320nm
，日光中波長介於 290~320nm的部分）。