美國NIGHTSEA專門致力於研究和開發熒光觀測裝備。NIGHTSEA熒光觀測利器包括:SFA-RB體視顯微鏡熒光適配器,DFP-1雙熒光蛋白手電筒係列,BLS2單熒光蛋白手電筒係列等。
小巧簡便的熒光觀測裝置,應用如下:
一 美國NIGHTSEA熒光觀測利器的應用之——轉基因生物觀測:如小鼠幼崽,果蠅幼蟲,線蟲,斑馬魚,等等。
1. 觀測轉基因生物——果蠅

觀測轉基因生物——斑馬魚
3. 觀測轉基因生物——爪蟾

4. 觀測轉基因生物——線蟲

5.觀測轉基因生物——蠑螈

6.觀測轉基因生物——擬南芥種子

美國NIGHTSEA熒光觀測利器的應用之——樣本預篩選和輔助解剖
熒光是細胞生物學、神經生物學及其它多個研究領域中一種強大和廣泛使用的工具。nightsea的DFP-1, BLS2和SFA-RB可以用於樣本的預篩選、輔助解剖等,下麵列舉幾個實例:
1. 熒(ying)光(guang)蛋(dan)白(bai)標(biao)記(ji)的(de)工(gong)程(cheng)病(bing)毒(du)載(zai)體(ti)在(zai)神(shen)經(jing)元(yuan)功(gong)能(neng)研(yan)究(jiu)中(zhong)應(ying)用(yong)十(shi)分(fen)廣(guang)泛(fan),常(chang)通(tong)過(guo)顱(lu)內(nei)注(zhu)射(she)研(yan)究(jiu)特(te)定(ding)腦(nao)區(qu)的(de)功(gong)能(neng)。在(zai)此(ci)中(zhong),常(chang)需(xu)要(yao)對(dui)病(bing)毒(du)表(biao)達(da)區(qu)域(yu)進(jin)行(xing)快(kuai)速(su)解(jie)剖(pou)用(yong)於(yu)特(te)定(ding)的(de)生(sheng)化(hua)分(fen)析(xi)。為(wei)了(le)提(ti)高(gao)快(kuai)速(su)解(jie)剖(pou)定(ding)位(wei)精(jing)準(zhun)度(du),研(yan)究(jiu)人(ren)員(yuan)選(xuan)用(yong)了(le)nightsea的BLS2 Bluestar手電筒觀測係列,通過配合nightsea濾光眼鏡準確確定注射表達了熒光蛋白的伏核區(文獻– Xuan Li and Marina E. Wolf, 2011. Visualization of virus-infected brain regions using a GFP-illuminating flashlight enables accurate and rapid dissection for biochemical analysis. J. of Neuroscience Methods, Vol. 201, Issue 1, pp. 177-179. LINK)

EGFP標記的慢病毒質粒注射進小鼠大腦區域(Marina Wolf, Rosalind Franklin University)
2. 研究者從小鼠大腦中提取GFP標記的背紋體。這項困難的工作因有了NIGHTSEA的DFP-1或BLS2(手電筒和眼鏡組合),而變得簡單:很容易看到大腦中的目標區域,從而讓解剖更準確、。


小鼠大腦中GFP標記的背紋體(Charles Mazel. Sample photographed at laboratory of Stefano Vicini, Georgetown University)
3. 用DFP-1雙熒光蛋白手電筒,BLS2單熒光蛋白手電筒,或SFA-RB體視顯微鏡熒光適配器,可以很快的檢測樣本是否成功染色(Alexa Fluor 488 Phalloidin標記),如下圖:

兔腰肌的肌纖維(用Alexa Fluor 488 Phalloidin標記)
左圖:白光觀測 右圖:Royal Blue熒光觀測(Motic SMZ-186體視顯微鏡觀測)
4.用SFA-RB體視顯微鏡熒光適配器以斑馬魚為模型,觀測不同有害化學物(醫藥、農藥、食品添加劑等)對大腦發育的影響。觀測圖片如下:

基因斑馬魚大腦共聚焦圖像
Kaede protein–綠色是未改變的,紅色是發生改變的,圖片由Robert Thorn(Creton Lab, 布朗大學)提供
5. 熒光是珊瑚采集研究的重要工具。現在,可以用經濟又實惠的SFA-RB體視顯微鏡熒光適配器安裝到體視顯微鏡上檢測珊瑚。
下麵的圖片是通過立體顯微鏡觀看珊瑚蟲,由UNCW威爾明頓納大學Alina Szmant 博士與NIGHTSEA Charles Mazel博士提供

6. 用於結核分枝杆菌重組株的篩選
在結核分枝杆菌中成功構建了高效同源重組係統,利用該係統構建了rv1364c、pstP跨膜區、pstP胞外區三個突變株,得到雙交換突變株的效率為25%-62.5%,從雙交換突變株得到無痕缺失突變株的效率為100%。通過gfp作為熒光標記基因,利用NightSea BlueStar藍光手電筒和濾光眼鏡,可以對平板上的基因缺失株直接進行快速判定。
本研究采用nightsea BLS2 BlueStar 藍lan色se手shou電dian筒tong和he濾lv光guang鏡jing對dui平ping板ban上shang的de結jie核he分fen枝zhi杆gan菌jun綠lv色se熒ying光guang蛋dan白bai菌jun落luo進jin行xing快kuai速su鑒jian定ding。該gai方fang法fa可ke以yi從cong幾ji百bai個ge菌jun落luo中zhong瞬shun間jian鎖suo定ding陽yang性xing克ke隆long。平ping板ban上shang的de菌jun落luo照zhao片pian拍pai攝she用yong單dan反fan相xiang機ji加jia載zai購gou自zinightsea公司的濾光片實現。


圖片源自[結核分枝杆菌同源重組基因敲除係統的構建和應用]
Good News標準的DFP-1雙熒光蛋白觀測鏡,隻有RB-Royal Blue和GR-Green兩種熒光激發裝置,也就是說標準的DFP-1隻能用於觀測綠色熒光蛋白和紅色熒光蛋白。
現在,您可以選擇以下任何兩種熒光裝置,組裝成您專屬的雙熒光蛋白手電筒啦。
| 熒光裝置型號 | Excitation激發光 | Emission發射光 | 可觀測熒光 |
| RB-Royal Blue | 440-460nm | 500nm LP | GFP, eGFP, fluorescein.... |
| CY-Cyan | 490-515nm | 550nm LP | YFP, Venus, Lucifer Yellow... |
| GR-Green | 510-540nm | 600nm LP | DsRed, dTomato... |
| VI-Violet | 400-415nm | 460nm LP | CFP, BFP... |
| UV-Ultra Violet | 360-380nm | 415nm LP | DAPI |
注:
1.RB-Royal Blue用於觀測綠色熒光蛋白
GFP:綠色熒光;EGFP:增強型綠色熒光;fluorescein熒光素
2.CY-Cyan用於觀測黃色熒光蛋白
YFP:黃色熒光蛋白;Venus:金色;Lucifer Yellow:熒光黃
3.GR-Green用於觀測紅色熒光蛋白
DsRed:紅色熒光蛋白;dTomato:番茄紅
4.VI-Violet用於觀測紫色熒光蛋白
CFP:青色熒光蛋白;BFP:堿性胎兒蛋白
5.UV-Ultra Violet用於觀測紫外光
DAPI:藍色熒光




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