熒光蛋白為什麼被用作熒光標簽?
因(yin)為(wei)熒(ying)光(guang)蛋(dan)白(bai)不(bu)但(dan)可(ke)以(yi)標(biao)記(ji)固(gu)定(ding)細(xi)胞(bao)及(ji)活(huo)細(xi)胞(bao)中(zhong)的(de)蛋(dan)白(bai),還(hai)可(ke)以(yi)標(biao)記(ji)不(bu)同(tong)的(de)細(xi)胞(bao)類(lei)型(xing),甚(shen)至(zhi)可(ke)以(yi)標(biao)記(ji)亞(ya)細(xi)胞(bao)器(qi)。熒(ying)光(guang)蛋(dan)白(bai)因(yin)為(wei)顏(yan)色(se)鮮(xian)豔(yan),圖(tu)像(xiang)直(zhi)觀(guan),不(bu)需(xu)要(yao)化(hua)學(xue)染(ran)色(se)和(he)底(di)物(wu),是(shi)活(huo)細(xi)胞(bao)分(fen)析(xi)的(de)理(li)想(xiang)選(xuan)擇(ze)。它(ta)常(chang)用(yong)於(yu)追(zhui)蹤(zong)啟(qi)動(dong)子(zi)活(huo)性(xing)、產生穩定細胞係、標記細胞或細胞器用於體內成像等。
怎麼選擇合適的熒光蛋白做標簽?
熒光蛋白作為熒光標簽用於實驗研究要選擇適合的,不是任何一種都可以。
1)要(yao)考(kao)慮(lv)你(ni)選(xuan)擇(ze)的(de)這(zhe)這(zhe)個(ge)熒(ying)光(guang)蛋(dan)白(bai)的(de)熒(ying)光(guang)顏(yan)色(se)和(he)你(ni)的(de)本(ben)體(ti)顏(yan)色(se)有(you)大(da)的(de)區(qu)別(bie),而(er)熒(ying)光(guang)蛋(dan)白(bai)被(bei)激(ji)發(fa)後(hou)的(de)顏(yan)色(se)是(shi)由(you)其(qi)發(fa)射(she)波(bo)長(chang)決(jue)定(ding)的(de),激(ji)發(fa)它(ta)發(fa)出(chu)熒(ying)光(guang)也(ye)要(yao)選(xuan)擇(ze)正(zheng)確(que)的(de)激發光源波長。
2)如果做多重實驗,就必須確保這幾種熒光蛋白的發射波長不重疊。
3)另外要考慮實驗的對象,如果是體外實驗就無所謂,大部分波長都可以,但如果是體內研究如小動物成像,要選擇那些在遠紅外區的長波,它能有效穿透身體組織,發揮作用。
4)不同熒光蛋白適用於不同的實驗目的:如有的適合標記細胞或細胞器,追蹤啟動子活性,有的適合構建融合蛋白(蛋白定位研究和產生穩定的細胞係用於長期培養),有的適合作為目的蛋白轉錄和翻譯的指示劑,有的適合三色分析,如黃、綠、紅三色熒光蛋白

上圖:GFPfinder-2101RB熒光手電筒篩選GFP陽性的小鼠(圖片轉自https://www.xepu.cn )
熒光蛋白激發光源都有哪些?
yingguangdanbaizaijifaguangyuandejifaxiacainengfachuyingguangjinxingshiyandeguancejiyanjiu。butongdeyingguangdanbaijifaguangyuanbuyiyang,xuyaogenjuqijifabochangxuanzeheshidejifaguangyuan。shanghaifengzhiyiqiyouxiangongsiyongyouduozhongyingguangdanbaijifaguangyuan,youdanbochangjifaguangyuan,youshuangbochangjifaguangyuan,yeyouduobochangjifaguangyuan,lingwaiyangshikegenjuyingyongchangjingxuanzeshoudiantongshi、手持式、桌麵式等。
熒(ying)光(guang)蛋(dan)白(bai)激(ji)發(fa)燈(deng)用(yong)於(yu)激(ji)發(fa)熒(ying)光(guang)蛋(dan)白(bai)發(fa)出(chu)熒(ying)光(guang),研(yan)究(jiu)人(ren)員(yuan)通(tong)過(guo)觀(guan)測(ce)熒(ying)光(guang)並(bing)記(ji)錄(lu)以(yi)實(shi)現(xian)相(xiang)應(ying)的(de)研(yan)究(jiu)。熒(ying)光(guang)蛋(dan)白(bai)激(ji)發(fa)燈(deng)作(zuo)為(wei)激(ji)發(fa)重(zhong)要(yao)的(de)一(yi)個(ge)工(gong)具(ju)該(gai)怎(zen)麼(me)選(xuan),上(shang)海(hai)峰(feng)誌(zhi)儀(yi)器(qi)有(you)限(xian)公(gong)司(si)教(jiao)你(ni)3步選好:
先看熒光蛋白
不(bu)同(tong)熒(ying)光(guang)蛋(dan)白(bai)的(de)激(ji)發(fa)波(bo)長(chang)是(shi)不(bu)一(yi)樣(yang)的(de),就(jiu)算(suan)是(shi)同(tong)係(xi)列(lie)的(de)熒(ying)光(guang)蛋(dan)白(bai)佳(jia)激(ji)發(fa)波(bo)長(chang)也(ye)是(shi)不(bu)一(yi)樣(yang)的(de)。首(shou)先(xian)要(yao)了(le)解(jie)被(bei)激(ji)發(fa)的(de)熒(ying)光(guang)蛋(dan)白(bai)激(ji)發(fa)波(bo)長(chang)是(shi)多(duo)少(shao)?再(zai)選(xuan)擇(ze)這(zhe)個(ge)波(bo)長(chang)的(de)激(ji)發(fa)燈(deng),這(zhe)樣(yang)激(ji)發(fa)出(chu)的(de)熒(ying)光(guang)才(cai)足(zu)夠(gou)亮(liang)且(qie)穩(wen)定(ding)。
用於什麼場景
不同用戶對於熒光蛋白的應用是不一樣的,如:種子篩選、植物愈傷組織觀測、轉基因驗證、細胞的運動……針對不同的使用場景需要的激發燈樣式不一,照射麵積不一……
熒光蛋白激發燈廠家
確定了以上2步就差不多做好了功能選項,第三部就是看熒光蛋白激發燈廠家,通過售前、質量、價格、服務、技術……綜合選擇
常見熒光蛋白激發波長如下:
1)紅色熒光蛋白RFP:激發波長532nm(綠光),發射波長588nm;
2)綠色熒光蛋白GFP:激發波長為 488 nm(藍光或紫光),發射波長507 nm;
3)藍色熒光蛋白BFP: 激發波長在400nm(紫)左右,發射波長在450nm左右;
4)黃色熒光蛋白YFP: 大激發波長為514 (綠光)nm,大發射波長為527 nm。
上海峰誌儀器有限公司專注熒光檢測燈20年,銷售的美國路陽和析浦科學儀器的熒光蛋白激發光源有單光源、雙光源、多duo光guang源yuan可ke選xuan。熒ying光guang蛋dan白bai激ji發fa燈deng樣yang式shi從cong便bian攜xie手shou電dian式shi到dao大da麵mian積ji桌zhuo麵mian式shi都dou有you,研yan發fa的de光guang學xue透tou鏡jing使shi其qi光guang照zhao度du超chao過guo同tong條tiao件jian的de其qi他ta檢jian測ce燈deng,另ling外wai也ye可ke根gen據ju用yong戶hu實shi際ji需xu求qiu進jin行xing定ding製zhi。

上圖:GFPfinder-2101RB熒光手電筒

上圖:LUYOR-3415RG雙波長熒光蛋白激發光源
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