美國路陽UCL-3200/UCL-3500紫外交聯儀在Northern blotting、Southern blotting、EMSA等尼龍膜、硝酸纖維素膜的交聯、Sterilization(滅菌)、DNA Nicking(DNA缺失)的應用。

1.Membrane Blotting
美國路陽儀器設備有限公司UCL-3500係列紫外交聯儀可用於Northern、Southern blotting、EMSA等膜交聯,當使用254 nm波長、能量為120.0mJ/cm2交聯時,尼龍模的氨基和DNA的胸腺嘧啶(或RNA的尿嘧啶)之間形成共價鍵穩定。
(1)將一張或兩張用轉移緩衝液(如10×SSC)輕輕潤濕的吸水紙放在UCL-3500係列紫外交聯儀的紫外輻照室。將尼龍膜放在吸水紙上,使附著核酸的一麵朝上,使紫外線燈管能夠直接照射核酸。
(2)關閉UCL-3500係列紫外交聯儀的門。
(3)按下STAR(運行)按an鍵jian啟qi動dong,當dang紫zi外wai線xian燈deng管guan亮liang時shi,顯xian示shi屏ping將jiang立li即ji開kai始shi從cong輸shu入ru值zhi開kai始shi累lei計ji。如ru果guo在zai曝pu光guang期qi間jian的de任ren何he點dian打da開kai門men,照zhao射she將jiang停ting止zhi,並bing顯xian示shi已yi曝pu光guang值zhi。(關上門按STAR按鍵繼續照射。)
(4)輻照完成後,蜂鳴器將鳴響約3–4秒。自動交聯大約需要25–50秒。
(5)取下尼龍膜並關上門,交聯完成。每次使用後,清潔紫外線交儀紫外輻照室,以清除殘留的鹽。
2.DNA Nicking
美國路陽儀器設備有限公司UCL-3200/UCL-3500紫外交聯儀也可用於切割溴化乙錠染色的瓊脂糖凝膠中的DNA,代替HCl洗滌液,瓊脂糖凝膠中比較大的DNA(>20kb)的轉模效率很低,因此DNA在轉移到尼龍膜之前需要進行前處理。DNA可通過HCl或紫外線照射進行切割。HCl脫嘌呤反應較難控製,且對溫度極為敏感。所以在轉移前,在短波長紫外光(254 nm)中80.0mJ/cm2切割DNA的方法更可靠。
3.Sterilization(滅菌)
紫外線shajun就是通過紫外線照射,破壞及改變微生物的DNA(脫氧核糖核酸)結構,使細菌當即死亡或不能繁殖,達到shajun的目的。真正具有shajun作用的是UVC紫外線,因為C波段紫外線很容易被生物體的DNA吸收,尤其是254nm波長左右紫外線佳。紫外線shajun屬於純物理方法,具有簡單便捷、光譜高效、無二次汙染。因此在短波長紫外光(254 nm)中滅菌95sec。
4.RecA Screening(RecA篩選)
UCL-3200/UCL-3500紫外交聯儀也可用於篩選RecA突變體,在短波長紫外光(254 nm)中40.0mJ/cm2照射下,recA突變體阻止了紫外線誘導損傷的修複,阻止了紫外照射過的過的recA細胞的生長。





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